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ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)的精度
更新時(shí)間:2015-06-11   點(diǎn)擊次數(shù):1038次

我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程做了總結(jié),逐步完善,也就是學(xué)習(xí),分享學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)。以下總結(jié)實(shí)驗(yàn)和解決共同的問(wèn)題,與你分享。
   1,包是非常重要的,蛋白質(zhì)濃度,原來(lái)的性質(zhì)是否降解,抗體,使你可以識(shí)別,從而節(jié)省抗原是非常重要的,我做的重組蛋白,他嚴(yán)厲警告我必須在冰浴是緩慢的融化是真理。有一些涂層可不是蛋白質(zhì),生物素和脂類或小分子,我們的裝修之前涂,我簡(jiǎn)要如下: 2460親和素-生物素抗生物素蛋白涂層:*載體,加入生物素標(biāo)記的,這種鍍膜的方法均勻,牢固,ELISA檢測(cè)試劑盒已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原定量測(cè)定。脂質(zhì):可以在有機(jī)溶劑(如酒精)孔加入溶解后,打開(kāi)冰箱隔夜或冷干,待酒精揮發(fā),在固體表面上進(jìn)行自然干燥的固體脂質(zhì)。小分子必須依靠和大的載體蛋白偶聯(lián)可以固定在固體載體上。
   2,包衣液的選擇,碳酸鹽緩沖液通常選擇9。6。但有時(shí)因?yàn)闇y(cè)試需求,數(shù)據(jù)包緩沖溶液是一種特殊的原料可采用中性包裝。應(yīng)注意以下原則:蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合,取決于在固相的疏水性基團(tuán)和疏水性相互作用的載體表面蛋白分子的結(jié)構(gòu),物理吸附是非特異性的,蛋白分子量,等電點(diǎn),大集中,小分子蛋白蛋白質(zhì)通常含有疏水基團(tuán)越多,所以更容易吸附在固相載體表面。測(cè)試也有很強(qiáng)的理論于實(shí)踐,看zui后一個(gè)可以應(yīng)用到我們的測(cè)試。除了剛才提到的9。6碳酸鹽緩沖液常用的涂料溶液,和磷酸鹽緩沖液和7-8 7。2 -緩沖。
   3,關(guān)閉:以下包之后是無(wú)關(guān)的蛋白質(zhì)溶液濃度高,涂層工藝。隨函附上使大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,和干擾物質(zhì)的免疫排斥和吸附步驟。ELISA試劑盒常用的密封:0。05% - 0。5%牛血清白蛋白;10%或1%明膠牛血清;ELISA檢測(cè)試劑盒脫脂奶粉,價(jià)格相對(duì)低廉,可用于高濃度(5%~10%);和一些罕見(jiàn)的使用各種動(dòng)物血清(主要是為了消除類似的蛋白和酪蛋白等干擾)。但到底選擇什么,根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體實(shí)踐。
   4,洗板:可以說(shuō),在中操作,清洗是在主要的關(guān)鍵技術(shù)。由于聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍存在的,為了實(shí)現(xiàn)自由酶與客觀相結(jié)合的標(biāo)記的分離,在板料孔中殘留游離和吸附的非特異性干擾物質(zhì)的去除,洗滌,并應(yīng)將干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)的非特異性吸附。所以在洗衣板會(huì)有一定的誤差,非常人的因素(當(dāng)然也有洗衣機(jī)除條件),ELISA檢測(cè)試劑盒是不完整的或弦清孔,系統(tǒng)的影響是如此敏感,但不小。

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