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ELISA試劑盒研究揭示細胞凋亡信號機制
更新時間:2014-04-18   點擊次數(shù):1338次

    近期來自第二軍醫(yī)大學(xué)、吉林大學(xué)等機構(gòu)的研究人員在新研究中,揭示了整合素連接激酶相關(guān)磷酸酶(ILKAP)調(diào)控細胞生存與凋亡的一條新信號機制。ELISA試劑盒相關(guān)論文發(fā)表在《生物化學(xué)雜志》(JBC)上。第二軍醫(yī)大學(xué)的肖建如(Jianru Xiao)教授和劉鐵龍 (Tielong Liu)教授為這篇文章的共同通訊作者。前者主要從事脊柱腫瘤及脊柱傷病的基礎(chǔ)臨床研究。后者長期從事脊柱外科臨床工作及相關(guān)研究。

    整合素連接激酶相關(guān)磷酸酶(ILKAP)是蛋白磷酸酶2C(PP2C)家族的新成員,雖然目前上對它的認識還很有限,但初步的研究結(jié)果已顯示這 是一種與細胞凋亡信號通路密切相關(guān)的蛋白磷酸酶。ILKAP廣泛表達于人體組織中,在骨骼肌、腎臟、肝臟中有高水平的表達。介導(dǎo)細胞凋亡是ILKAP的主 要生理功能,因而與腫瘤等疾病的發(fā)生、發(fā)展存在密切的關(guān)系。

    一些研究表明,ILKAP可能是通過負調(diào)控整合素(integrin)激酶信號通路,以及正調(diào)控c-Jun氨基末端激酶/促分裂原活化蛋白激酶 (JNK/MAPK)信號通路發(fā)揮作用。ELISA試劑盒在以往的研究中,有人證實ILKAP是通過與磷酸化整合素連接激酶1(ILK1)相互作用對整合素蛋白信號進行了 負調(diào)控,并提出ILKAP可能是一種胞質(zhì)蛋白。

    在這篇文章中,研究人員發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性和標(biāo)記的ILKAP均主要定位于細胞核,核定位信號(NLS) 輸入蛋白importin介導(dǎo)ILKAP發(fā)生了核轉(zhuǎn)運。ILKAP與importinα1、α3和α5發(fā)生了直接相互作用。研究人員證實ILKAP的NLS定位在N末端區(qū)域第71-86位氨基酸之間。ELISA試劑盒當(dāng)他們敲除ILKAP蛋白的NLS時, 發(fā)現(xiàn)會導(dǎo)致ILKAP定位到細胞質(zhì)中。他們證實Lys-78和Arg-79對于ILKAP與importinα結(jié)合至關(guān)重要。此外,研究人員還發(fā)現(xiàn)核ILKAP與核糖體S6激酶RSK2發(fā)生了相互作用,通過抑制RSK2活性,下調(diào)RSK2下游底物cyclin D1水平,誘導(dǎo)了凋亡。

    這些研究結(jié)果表明ILKAP可由importin介導(dǎo)發(fā)生核轉(zhuǎn)運,在細胞核中通過調(diào)節(jié)RSK2信號調(diào)控了細胞生存和凋亡。

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